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          荧光定量PCR服务

          荧光定量PCR技术是普通PCR技术的改良和发展,它提高了普通PCR技术的特异性和准确性,能做到实时监控和准确定量,广泛应用于基础研究、临床检验、海关商贸检疫等各个领域。


          荧光定量PCR技术优势

          l 灵敏度高,可以检测低拷贝的目的基因;

          l 高精度,PCR扩增阶段包括3个阶段:指数增长期,线性增长期和平台期,96个重复指数增长期表现出高精度,而平台期则变化差异较大;

          l 定量能力强,简单的流程就能得到高质量的定量数据;

          l 动力学范围宽,可以精确定量9个数量级的差异;

          l 速度快,节省时间和劳力,不需要电泳检测;

          l 安全,使用荧光染料发光,不用EB或放射性物质,极大降低对实验人员健康的威胁;

          l 重复性好。

           

          服务内容 核酸提取和反转录

          根据客户要求提取动物、植物、细胞和细*等样品DNA或RNA

          对所提RNA进行反转录以用于荧光定量PCR反应;


          合成

          设计合成各种引物并可根据客户要求负责引物的调试;

          针对不同引物构建标准品用于绝对定量或相对定量实验;

          设计合成各种标记探针并可根据客户要求负责探针的调试。

           

          检测

          l mRNA表达检测

          l MicroRNA表达和靶基因表达检测

          l SNP检测

          l 基因copy数检测

          l 病原微生物样品检测

           

          研发

          接受采用荧光定量PCR的检测方法针对各种检测目标的合作研发和委托研发。

           

          检测方法

          捷瑞提供两种PCR检测方法服务:SYBR Green I染料法和TaqMan/MGB探针法。

           

          一、染料法:SYBR Green Ⅰ

          游离状态下的SYBR Green分子发出微弱的荧光信号,当与dsDNA双螺旋小沟区域结合时,则发出绿色荧光,可在520nm波长下检测荧光信号,荧光信号的强度与dsDNA数量呈正相关。

          SYBR Green Ⅰ染料法的特点:

          高灵敏度,低背景信号,操作简单,不影响酶促反应,价格便宜。

           

           

          二、探针法:TaqMan荧光探针/ MGB探针

          TaqMan 荧光探针是一种寡核苷酸探针,荧光基团连接在探针的5`末端,一般用FAM、VIC、HEX、Cy3、Cy5等荧光基团,而淬灭剂则在3`末端,一般为TAMRA、BHQ1、BHQ2等,其中TAMRA发出黄色荧光,BHQ1和BHQ2不发出荧光。PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。

           

           

          TaqMan-MGB探针与普通TaqMan荧光探针相比具有更短的序列和更高的序列特异性,常被用于SNP分型的研究中,有望成为基因诊断和个体化用药分析的首选技术平台。

           

          探针法的特点:

          与染料法相比具有更低的背景信号,更高的灵敏度,可以检测低于10个分子的模板,更高的特异性,结果也更准确。同时也具有染料法的操作简单,不影响酶促反应等优点。

           

          捷瑞服务优势:

          * 在上海、北京、广州、南京、杭州设立引物合成基地,拥有高品质、高通量TaqMan探针和MGB探针合成能力;

          * 专业客户团队为您提供方案咨询、优化、引物设计和结果分析服务;

          * 拥有多台ABI7900、ABI7500大通量荧光定量PCR实验平台;

          * 可为客户提供更为快速准确、价格更加合理的探针法定量PCR服务。


          服务流程

          PCR引物和探针设计合成及调试→标准品制作→样本核酸抽提→反转录→荧光定量PCR扩增检测→数据汇总和初步分析


          温馨提示:下单流程

          捷瑞网站首页→订单下载→下载荧光定量PCR服务订单→填写完整实验信息→发送至support@generay.com.cn

           

          客户需要提供信息

          详细的实验要求,基因名称(提供Gene ID),待测样本(清晰样品编号),保证样本质量。

           

          送样要求

          细胞(≥105个);基因组DNA(≥5ug)

           

          检测周期

          常规检测任务2-3周内完成,具体时间根据要检测的基因和样本数而定。

           

          报告内容

          提供电泳图片、荧光扩增曲线、标准曲线、熔解曲线、原始数据、实验报告等。

          注:可到登陆捷瑞公司首页→技术支持→技术资料 →下载定量检测报告示例。


          友情链接:http://www.hstbio.cn

           

            

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